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淺析SEM掃描電鏡生物樣品制備技術(shù)

更新時(shí)間:2021-10-23      點(diǎn)擊次數(shù):1887
  掃描電子顯微鏡,簡(jiǎn)稱為掃描電鏡,英文縮寫為SEM(Scanning Electron Microscope)。它是用細(xì)聚焦的電子束轟擊樣品表面,通過電子與樣品相互作用產(chǎn)生的二次電子、背散射電子等對(duì)樣品表面或斷口形貌進(jìn)行觀察和分析。SEM已廣泛應(yīng)用于材料、冶金、礦物、生物學(xué)等領(lǐng)域。
  SEM掃描電鏡由電子槍、電磁透鏡、掃描線圈和樣品室等部件組成。作用:獲得掃描電子束、作為產(chǎn)生物理信號(hào)的激發(fā)源。為了獲得較高的信號(hào)強(qiáng)度和圖像分辨率,掃描電子束應(yīng)具有較高的亮度和盡可能小的束斑直徑。
  電子槍利用陰極與陽極燈絲間的高壓產(chǎn)生高能量的電子束。目前大多數(shù)掃描電鏡采用熱陰極電子槍。優(yōu)點(diǎn):燈絲價(jià)格便宜,真空要求不高;缺點(diǎn):發(fā)射效率低,發(fā)射源直徑大,分辨率低?,F(xiàn)在,高等級(jí)掃描電鏡采用六硼化鋪(LaB6)或場(chǎng)發(fā)射電子槍,二次電子像的分辨率可達(dá)到2nm。掃描電鏡的分辨率與電子在試樣上的小掃描范圍有關(guān)。通常電壓為130kV。
  SEM掃描電鏡生物樣品制備技術(shù):
  常規(guī)電鏡樣品要求:
  必須是干燥的,不含水分或揮發(fā)性物質(zhì);
  具有一定機(jī)械強(qiáng)度,能耐受電子束轟擊;
  具有導(dǎo)電性,被激發(fā)時(shí)能夠產(chǎn)生足夠的二次電子。
  生物材料特點(diǎn):含水分多,質(zhì)地柔軟,機(jī)械強(qiáng)度小;組成元素的原子序數(shù)低,導(dǎo)電性差,激發(fā)后二次電子的產(chǎn)額較少。
  制樣的任務(wù):通過一系列處理,既要盡量保存材料的固有形態(tài),又要改良其物理性能,使其適合在電鏡下觀察成像。

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